干细胞研究|人类胚胎干细胞如何产生?

人类胚胎干细胞系的建立：

目前，一些报道描述了在世界各地的各种实验室中人类胚胎干细胞系的建立，并且利用了多种人类胚胎干细胞衍生方法。通常，ICM的免疫外科隔离是由Solter和Knowles在1975年开发的一种方法，已成为进行胚胎干细胞衍生的大多数实验室的普遍做法。免疫外科手术的基本原理是利用抗体/补体反应裂解滋养外胚层。

胚胎干细胞的培养：

首先，用链霉蛋白酶处理膨胀的胚泡以溶解透明带。然后用抗人全血清抗体和豚鼠补体处理不含ZP的胚泡。将胚泡及其溶解的滋养外胚层在新鲜培养基中冲洗，然后从溶解的滋养外胚层中分离出ICM。然后将分离的ICM在涂有明胶的组织培养皿中的有丝分裂失活的饲养细胞层上培养，从而产生人胚胎干细胞系。

然而，免疫外科手术并非在所有情况下都是选择的方法。由于在人类胚胎干细胞的衍生中使用了体外发育的胚泡，并非所有胚胎结果都会发育成良好的膨胀胚泡，其特征是大而独特的ICM。在某些情况下，这些胚胎表现出较小的ICM。在许多情况下，囊胚还表现出定义不清的ICM。近期，根据囊胚的质量，我们引入了三种可用于人类胚胎干细胞衍生的方法。这些方法是免疫外科手术方法，整个胚胎培养方法和部分胚胎培养方法。